液相色譜柱的使用注意事項!
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液相色譜柱作為液相色譜分析系統的核心部件,其性能優劣直接關乎分析結果的準確性與可靠性。為確保色譜柱長期穩定、高效運行,使用者需嚴格遵循一系列使用注意事項。
一、新色譜柱啟用要點
1、初始活化流程:新購置的色譜柱在初次使用時,務必先用 10 – 20 倍柱體積的色譜級甲醇或乙腈,以低流速開啟沖洗程序。這一步驟至關重要,猶如給新車磨合,能有效去除柱內可能殘留的雜質、污染物,同時使固定相充分浸潤,為后續精準分離打基礎。隨后,切換至 10% 甲醇溶液,同樣由低流速逐步過渡至正常流速繼續沖洗。如此精細操作,可確保色譜柱從初始狀態就進入最佳性能區間,避免因倉促使用引發柱效降低、峰形畸變等問題。
2、方向確認關鍵:分清色譜柱方向是不容小覷的環節。大多數色譜柱柱身上標有箭頭,指示流動相的正常流向。這是基于色譜柱內部填料裝填工藝與結構特性所設定,逆向流動可能擾亂填料分布,破壞柱床均勻性,進而大幅削減柱效,使分離工作功虧一簣。
3、保護柱協同運用:盡量在色譜柱前段加裝保護柱,堪稱延長色譜柱壽命的 “妙招”。保護柱內裝填的填料能預先截留樣品中的大分子雜質、顆粒物等,防止其侵入并損害色譜柱內昂貴的填料。并且,需定期清洗保護柱,維持其攔截雜質的能力,讓色譜柱時刻處于 “輕裝上陣” 的良好狀態。
二、日常使用后的沖洗規范
每次使用完畢,及時且恰當的沖洗是維持色譜柱活力的必要手段。應先用 10% 甲醇 / 水混合溶液沖洗,借助該溶液既能洗脫吸附在柱上的水溶性雜質,又能借助甲醇成分去除部分脂溶性殘留物。若色譜柱短期內不再使用,還需進一步用純甲醇沖洗、保護。一般建議在低流速下,用 10% 甲醇 / 水沖洗過夜,給予充足時間讓雜質充分脫離柱體,確保下次啟用時色譜柱依然 “狀態在線”。
三、色譜柱再生技巧
當色譜柱出現柱效下降、峰拖尾嚴重等性能衰退跡象時,適時的再生操作可助其 “重煥生機”。通常采用相當于 20 倍柱體積的溶劑按特定順序沖洗柱子,盡可能依照色譜柱箭頭方向操作,盡量避免反沖。首先以 10% 甲醇 / 水溶液沖洗,初步清除水溶性與部分弱極性雜質;接著換用甲醇,深度洗脫殘留的有機雜質;隨后引入氯仿(或異丙醇),憑借其強溶解能力瓦解頑固污垢;最后再用甲醇沖洗回正,恢復柱體初始化學環境。另一種方法是利用熱蒸餾水(55℃)結合四次注射 100μl DMSO,熱蒸餾水利用溫度升高增強清洗效能,DMSO 則憑借獨特化學性質助力溶解復雜污染物,雙管齊下修復色譜柱性能。
總之,嚴格遵循上述液相色譜柱使用注意事項,精心呵護這一精密部件,方能使其在液相色譜分析舞臺上持續穩定發揮,為科研、質檢等工作輸出精準可靠數據。
發布于: 2025-01-08