大分子樣品檢測用什么色譜柱?
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大分子樣品檢測通常需要根據樣品的性質(如分子量、極性、酸堿性等)選擇合適的色譜柱。以下是一些常見色譜柱類型及其適用場景:
1.?反相色譜柱(RP-HPLC)
反相色譜柱適用于分離和分析蛋白質、肽段等生物大分子。其特點是使用非極性固定相(如C4、C8、C18)和極性流動相,通過疏水作用實現分離。例如:
恒譜生 C8-Bio 色譜柱:適用于蛋白質、多肽、抗體藥物等大分子生物樣品的檢測,具有高選擇性和良好的穩定性。
月旭 Xtimate C4 300? 色譜柱:適用于蛋白質、多肽等生物大分子的分析,具有高柱效、長壽命和寬pH耐受性。
2.?尺寸排阻色譜柱(SEC)
尺寸排阻色譜(SEC)通過分子大小(流體動力學半徑)進行分離,適用于分析蛋白質、抗體、核酸等生物大分子。例如:
安捷倫 AdvanceBio SEC 色譜柱:適用于超大分子(如腺相關病毒AAV、病毒樣顆粒VLP等)的分析,提供500 ?和1000 ?孔徑規格,能夠實現高分離度和快速分析。
恒譜生 Bio-SEC 色譜柱:適用于多種生物大分子,如蛋白質、核酸、抗體等,提供120 ?、300 ?等不同孔徑規格,滿足不同分子量范圍的檢測需求。
3.?疏水相互作用色譜柱(HIC)
HIC適用于分析蛋白質等生物大分子,通過疏水基團與樣品的相互作用實現分離。通常用于抗體藥物偶聯物(ADC)的藥物抗體比(DAR)分析。
4.?離子交換色譜柱(IEX)
離子交換色譜柱通過樣品的電荷特性進行分離,適用于蛋白質、肽段等生物大分子的分析。選擇柱子時需根據樣品的等電點(pI)選擇合適的陽離子或陰離子交換柱。
5.?親和色譜柱
親和色譜柱通過特異性配體與目標分子的結合實現分離,如Protein A親和色譜柱常用于IgG抗體的純化。
選擇建議
分子量較大:優先選擇孔徑較大的SEC色譜柱(如300 ?、500 ?、1000 ?)。
需要高分辨率:選擇反相色譜柱(如C4、C8)。
樣品酸堿性較強:選擇耐酸堿性較強的色譜柱。
如果需要更具體的建議,可以提供樣品的具體信息(如分子量、極性等),以便進一步優化選擇。
發布于: 2025-03-10