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  • 為什么 HPLC 色譜柱比 GC 色譜柱短?

    為什么 HPLC 色譜柱比 GC 色譜柱短?

    ? ? ? ? HPLC和GC是已在化學實驗室中站穩腳跟的分離技術。這兩種技術的基本目的是分離和量化有機混合物的成分。 ? ? ? ? 您有沒有想過為什么HPLC色譜柱比 GC 色譜柱更短更寬。在回答這個問題之前,您應該了解柱長度的好處。 ? ? ? ? 一、柱長: ? ? ? ? 隨著液相色譜柱長度的增加,洗脫化合物和固定相之間的相互作用時間...
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  • 液相色譜中的過濾器和過濾作用

    液相色譜中的過濾器和過濾作用

    ? ? ? ? 以“清潔”流動相將樣品輸送至液相分析柱對于穩健的方法和高質量的結果非常重要。過濾器與高效液相色譜 (HPLC) 儀器的正確、可靠運行有關。 ? ? ? ? 過濾器和過濾的主題在 LC 中非常重要,因為如果流動相流路中存在微粒,LC 系統中的許多組件很容易過早失效。例如,從溶劑瓶中抽出的流動相中的灰塵或其他顆粒會導...
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  • 使用 HPLC 純化綠茶中的多酚

    使用 HPLC 純化綠茶中的多酚

    ? ? ? ? 綠茶被廣泛認為是地球上最健康的飲料之一。縱觀歷史,綠茶一直被用作治療多種疾病的民間療法,今天它繼續被提倡作為補充和替代藥物,雖然它一直備受爭議。現代研究并沒有消除這些長期存在的假設,而是讓人們相信綠茶相關的健康益處。 ? ? ? ? 綠茶的藥用特性源自茶樹種,廣泛歸因于該植物的高酚含量。使用高效液...
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  • 液相保護柱的作用

    液相保護柱的作用

      ? ? ? ? 任何HPLC或UHPLC柱都是有試用壽命的。正確使用和維護色譜柱可以延長其使用壽命,有利于該方法的經濟性。重要的是遵循公認的色譜慣例,如適當的樣品制備(樣品應通過0.45μm的膜過濾器進行高效液相色譜過濾,通過0.22μm的過濾器進行超高效液相色譜過濾);流動相的適當質量/純度(例如,用于等度模式的等度...
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  • 液相色譜工作流程

    液相色譜工作流程

    ??????? 無論正在利用何種相互作用,液相柱色譜法都分六個步驟進行: 柱平衡 樣品裝載 洗滌 洗脫 清洗 色譜柱再生 ???????? 一、柱平衡: ??????? 大多數液相色譜方案從樹脂平衡步驟開始。與目標蛋白質和所選樹脂相容的緩沖液通過柱子。一種常見的做法是用 5-10 柱體積 (CV) 的平衡緩沖液平衡柱。例如,蛋白質與疏水相互...
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  • 梯度洗脫后的色譜柱重新平衡的時間

    梯度洗脫后的色譜柱重新平衡的時間

    ? ??????? 許多用戶對溶劑梯度洗脫分離后 LC 色譜柱應該重新平衡多長時間有疑問。在這里,我們展示了對于反相和 HILIC 分離而言,再平衡周期短的令人滿意的結果。 ??????? LC 用戶通常會提出和討論關于在溶劑梯度洗脫分離后重新平衡 LC 色譜柱多長時間的問題。在本文中,我們根據最近對該主題的研究討論了細節,并表明即...
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  • 高效液相色譜法提取和純化木糖醇

    高效液相色譜法提取和純化木糖醇

    ??????? 高效液相色譜法是提取和純化甜味劑木糖醇的可靠技術。木糖醇在食品工業中被廣泛用作替代甜味劑;它的甜味與蔗糖相似,熱量只有三分之二。這種五碳糖存在于許多植物中,但大多濃度較低(約 1%),因此提取和純化成本很高。因此,迄今為止,木糖醇主要通過化學方法生產,使用催化木糖脫氫。 ? ??????? 一、在木糖...
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  • 保持液相色譜柱柱溫有助于準確性和穩定性

    保持液相色譜柱柱溫有助于準確性和穩定性

    ??????? 溫度的變化會對色譜分析方法的重現性和色譜柱的壽命產生重大影響。但為什么會這樣?恒譜生在以下的內容將會為您介紹。 ??????? 一、再現性 ??????? 隨著溫度的變化,液相色譜柱內固定相和流動相之間的熱力學會受到直接影響。在不同溫度下運行方法可能會影響分析物容量因子 (k) 或分析物在色譜柱上的保留時間。 ?...
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  • HPLC溶劑進樣口過濾器過濾流動相的重要性

    HPLC溶劑進樣口過濾器過濾流動相的重要性

    ? ??????? 緩沖液是一種含有弱酸及其共軛堿(或弱堿及其共軛酸)的水溶液。加入少量強酸或強堿后,緩沖溶液的 pH 值變化很小,當小的環境因素發生變化時,有助于抵消分析方法中的條件變化。緩沖溶液用于將 pH 值保持在幾乎恒定的值。由于這種弱酸 (HA) 與其共軛堿之間存在平衡,它們對 pH 變化具有抵抗力。 ??????? 一、...
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  • 高效液相色譜儀器組成

    高效液相色譜儀器組成

    ??????? HPLC 色譜儀器可以是一組單獨的模塊或元件,但也可以設計為單個裝置。模塊概念在單個組件失效的情況下更加靈活;此外,系統各個零件不必來自同一制造商。如果您不喜歡自己進行小修,您會更喜歡緊湊型儀器。然而,這并不需要比模塊化套件更少的工作臺空間。 ??????? 一臺 HPLC 儀器至少具有溶劑罐、帶篩板的傳輸...
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  • 深入了解液相色譜柱小型化

    深入了解液相色譜柱小型化

    ??????? 雖然質譜聯用液相色譜已被證明是發現組學(蛋白質組學、脂質組學、代謝組學、食物組學和糖組學)領域的強大工具。組學研究經常受到樣本復雜性的挑戰。在處理少量樣品、小體積和復雜的樣品基質(生物流體和單細胞分析)時,對感興趣的分子進行識別和量化可能特別困難。液相色譜柱小型化可以克服這些挑戰。減小色...
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  • HPLC 基礎知識——所有關于液相色譜的基礎知識

    HPLC 基礎知識——所有關于液相色譜的基礎知識

    ??????? 液相色譜作為最常用的色譜被廣泛應用于生物、化學、食品分析等領域,hplc的種類有哪些?恒譜生帶你了解! ??????? 一、液相色譜的種類 1、吸附色譜 以硅膠或氧化鋁為固定相。分子與硅膠之間的弱相互作用鍵稱為吸附,鍵的溶解解吸。由于洗脫液分子先于樣品分子占據硅膠的活性位點,因此樣品分子只有在與活性位點...
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  • C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理

    C18 固定相在反相方面最常用的原因及其工作原理

    ??????? 將C18 固定相稱為用的最多的化學物質之一可能更合適。在色譜柱供應商中,這一階段的不斷增長的品種肯定不少。然而,在我們深入研究手頭的主題之前,這里簡要回顧一下 C18 固定相是如何產生的。 ??????? 一、反相色譜 ??????? 隨著更多科學家參與反相色譜該領域,色譜中引入了額外的分離模式,以分離和純化許多不...
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  • 高效液相色譜及其部件介紹

    高效液相色譜及其部件介紹

    ??????? 高效液相色譜(HPLC) 是一種流行且用途廣泛的技術,可為復雜有機樣品的成分的分離、鑒定和定量提供經濟實惠的解決方案。了解各個組成部分以及每個組成部分如何有助于分析的整體可靠性非常重要。 ??????? 一、高效液相色譜及其部件介紹 系統主要組成部分為: 泵 探測器 根據應用產生無限數量的其他配置。比如流動...
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  • 色譜分析里的柱層析

    色譜分析里的柱層析

    ??????? 柱層析被描述為一種有用的技術,其中待分離的物質被置于裝有吸附劑(固定相)的柱子的最高點上,以不同的速率通過柱子,這取決于每種物質對吸附劑的親和力。吸附劑和溶劑或溶劑混合物,并且通常在不同時間從柱中通過時聚集在溶液中。 ??????? 兩種最常見的柱色譜固定相是硅膠和氧化鋁,而有機溶劑被認為是最常見...
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  • HPLC保護柱的使用原理

    HPLC保護柱的使用原理

    ??????? HPLC 色譜柱是液相色譜的重要組件,因為它是負責分離基質中分析物的色譜柱。保護和保養色譜柱可確保我們不僅獲得可靠的結果,還能無故障操作。我們都知道 HPLC 色譜柱的使用壽命是有限的,但是如何確保獲得最長的使用壽命呢? 要回答這個問題,讓我們首先看看色譜柱可能被阻塞的原因。 ??????? 一、引入 HPLC 色...
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  • 使用制備液相色譜的工作流程和技巧

    使用制備液相色譜的工作流程和技巧

    ??????? 本文的重點是快速液相色譜和高效液相色譜。沒有一種完美的協議適合每一種分離目的。因此,建議為您的特定應用程序優化方法。通過本文中列出的建議以及一些前期閱讀和測試,您將輕松純化您正在尋找的組件。 ??????? 一、快速液相色譜純化 ??????? 使用快速色譜法進行純化的缺點是該方法固有的分辨率較低。快速液...
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  • hplc液相色譜系統準備緩沖液的技巧

    hplc液相色譜系統準備緩沖液的技巧

    ???????? 液相色譜是世界各地實驗室使用的流行純化技術。如果系統設置和操作正確,它可以立即從混合物中分離出所需的化合物。學習如何使用和制備緩沖液和溶劑是能提高系統性能的重要技巧之一。準確制備和正確選擇緩沖液對于在液相色譜中獲得可重復的結果至關重要。 ????????? 一、了解您的化合物 ????????? 如果您正在尋...
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  • 質譜和液相色譜

    質譜和液相色譜

    ??????? 質譜 (MS) 使研究人員能夠研究許多特性,例如樣品的分子量、結構、特性、數量和純度。當與液相色譜技術相結合能成為一種強大的分析工具,能夠從復雜的生物混合物(如牛奶、血清和全脂)中提取有關一系列化合物的有意義的數據,包括藥物代謝物、肽和蛋白質-細胞裂解物。 ??????? 一、液相色譜與質譜 ??????? 在將...
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  • 選擇還是不選擇UHPLC

    選擇還是不選擇UHPLC

    ??????? UHPLC是一種專門的色譜方法,與 HPLC 相比,它運行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 μm)的較小色譜柱來實現這一點。生物化學、細胞和分子生物學、臨床醫學和許多其他領域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質、肽、代...
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  • HPLC 色譜柱挑選指南

    HPLC 色譜柱挑選指南

    ??????? 一、分離模式 ??????? 選擇色譜柱的首要任務是選擇分離模式。分離分子的方法有很多,其中應用最廣泛的包括反相、正相、親水相互作用、離子交換和尺寸排阻 HPLC。還有一些不太常見但更專業的分離模式,例如使用手性固定相或流動相的特定手性色譜。 ??????? 反相色譜柱通常用于非極性或弱極性有機化合物,它包含非...
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  • 維護液相色譜柱良好狀態指南

    維護液相色譜柱良好狀態指南

    ??????? 將色譜柱保持在最佳狀態將大大有助于改進和標準化您的分離操作,同時確保色譜柱的使用壽命。您可以采取以下措施來實現這一目標。 ??????? 一、注意清潔。如果您從一開始就注意并定期清潔,那么色譜柱 的使用壽命會更長。清潔色譜柱所需的溶劑、酸或堿的類型取決于它們的設計和吸附劑的具體類型。雖然有些色譜柱...
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  • 超高效液相色譜—UHPLC改進大蛋白質分子的分離度

    超高效液相色譜—UHPLC改進大蛋白質分子的分離度

    ??????? 首次將 UHPLC 用于小分子分離時,能得到很好的峰形,但是蛋白質峰的分離幾乎沒有那么好,因此通常不可能顯著縮短運行時間。然而,最近對蛋白質進一步改進讓UHPLC 可以提供更好的分離度和更短的運行時間。雖然 UHPLC 不能讓科學家始終看到蛋白質之間的所有差異,但它可以讓他們看到一些差異——例如,在大體形態、...
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  • 如何選擇HPLC還是UHPLC?

    如何選擇HPLC還是UHPLC?

    ??????? UHPLC是一種專門的液相色譜方法,與 HPLC 相比,它運行速度更快、分辨率更好并且使用的溶劑更少。UHPLC 通過使用填充較小顆粒(通常直徑小于 2 μm)的較小色譜柱來實現這一點。生物化學、細胞和分子生物學、臨床醫學和許多其他領域的研究人員依靠 UHPLC 從混合物中分離不同類型的分子——無論這些分子是蛋白質、肽...
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